中和抗体是由B淋巴细胞分泌的可溶性蛋白,能够特异性识别病原体(如病毒、细菌)表面抗原,通过阻断其与宿主细胞受体的结合,阻止病原体入侵和复制,是评估疫苗效果和免疫应答的核心指标。常用的中和抗体检测方法大致可归为三种:真病毒中和实验、Elisa中和实验、假病毒中和实验(Pseudovirion-BasedNeutralizationAssay ,PBNA)。
真病毒中和实验:直接使用活病毒来完全模拟自然感染过程,从而检测中和抗体阻断病毒入侵宿主细胞的能力。然而,由于真病毒具有传染性和致病性,对实验室等级要求较高(高致病性病毒需在BSL-3实验室操作)。
Elisa中和实验:具有无需细胞培养、检测速度快、安全性高等特点。然而,其可能漏检非结合型中和抗体,且灵敏度不足,易出现假阳性或假阴性的错误结果。
PBNA:假病毒无自主复制能力,生物安全性较高,可在BSL-2实验室操作;可实现高通量与自动化——基于荧光素酶(Luc)或绿色荧光蛋白(GFP等)报告基因,支持96/384孔板检测,结果通过化学发光仪或Celigo自动读取。然而与真病毒相比仍存在一定的差异性。
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指标 |
真病毒中和实验 |
Elisa中和实验 |
假病毒中和实验 |
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生物安全要求 |
BSL-3(高危病毒) |
BSL-1 |
BSL-2 |
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检测周期 |
5-7天 |
1-2小时 |
1-2天 |
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通量 |
低 |
中 |
高 |
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功能性评估 |
完整感染周期 |
仅抗原结合 |
仅入侵阶段 |
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灵敏度 |
高(金标准) |
中低 |
高(接近真病毒) |
根据世界卫生组织(WHO)的疫苗生产和控制指南,推荐使用PBNA来评估针对人类乳头瘤病毒(HPV)、狂犬病毒(RV)、肠道病毒71型(EV71)、人类免疫缺陷病毒(HIV)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、埃博拉病毒(EBOV)等疫苗的有效性。
假病毒(Pseudoviruses)是一种具有单轮感染能力的重组病毒颗粒,对于无包膜病毒通常利用其自身结构蛋白制备假病毒;对于包膜病毒,一般常用水疱性口炎病毒(VSV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)等包装体系制备假病毒。
劲帆医药根据《基于假病毒的中和抗体检测法指导原则》,对中和抗体类假病毒进行了制备及分析方法的开发,并建立了完整的制备与检测体系,可提供假病毒中和抗体检测服务,助力疫苗及流行病学研究。
以慢病毒为例的假病毒的生产及中和抗体检测示意图(图片来源:Fantoni,Tobia et al, Journal of visualized experiments.,2023)
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携带报告基因的AAV病毒:Luciferase/EGFP/mCherry;AAV空壳病毒 |
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AAV1 |
AAV1/2 |
AAV2 |
AAV2-7m8 |
AAV oligo001 |
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AAV5 |
AAV6 |
AAV6m |
AAV6.2 |
AAV7 |
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AAV8 |
AAV9 |
rAAV2-retro |
AAV-PHP.eB |
AAV-B10 |
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AAV-PHP.S |
AAV-PAN |
AAV-DJ |
AAV-ShH10 |
AAV-ShH10(Y445F) |
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AAV-Rh10 |
AAV-Anc80L65 |
AAV-BR1 |
AAV-BI30 |
AAV-SCH9 |
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AAV MaCPNS1 |
AAV MaCPNS2 |
mac |
AAV DSS |
...... |
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我司可提供用于中和抗体和总抗体检测的AAV产品,更多其他血清型病毒生产请咨询 |
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类型 |
产品编号 |
产品名称 |
装载基因 |
规格(/支) |
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HPV(6) |
PSNAb-0001-Luc |
PS-HPV(6)-VLP-L1&L2-Luciferase |
Luciferase |
500μL/支 |
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PSNAb-0001-EGFP |
PS-HPV(6)-VLP-L1&L2-EGFP |
EGFP |
500μL/支 |
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PSNAb-0001-mCherry |
PS-HPV(6)-VLP-L1&L2-mCherry |
mCherry |
500μL/支 |
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PSNAb-0001-Luciferase&EGFP |
PS-HPV(6)-VLP-L1&L2-Luciferase&EGFP |
Luciferase&EGFP |
500μL/支 |
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HPV(11) |
PSNAb-0002-Luc |
PS-HPV(11)-VLP-L1&L2-Luciferase |
Luciferase |
500μL/支 |
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PSNAb-0002-EGFP |
PS-HPV(11)-VLP-L1&L2-EGFP |
EGFP |
500μL/支 |
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PSNAb-0002-mCherry |
PS-HPV(11)-VLP-L1&L2-mCherry |
mCherry |
500μL/支 |
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PSNAb-0002-Luciferase&EGFP |
PS-HPV(11)-VLP-L1&L2-Luciferase&EGFP |
Luciferase&EGFP |
500μL/支 |
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HPV(16) |
PSNAb-0003-Luc |
PS-HPV(16)-VLP-L1&L2-Luciferase |
Luciferase |
500μL/支 |
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PSNAb-0003-EGFP |
PS-HPV(16)-VLP-L1&L2-EGFP |
EGFP |
500μL/支 |
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PSNAb-0003-mCherry |
PS-HPV(16)-VLP-L1&L2-mCherry |
mCherry |
500μL/支 |
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PSNAb-0003-Luciferase&EGFP |
PS-HPV(16)-VLP-L1&L2-Luciferase&EGFP |
Luciferase&EGFP |
500μL/支 |
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HPV(18) |
PSNAb-0004-Luc |
PS-HPV(18)-VLP-L1&L2-Luciferase |
Luciferase |
500μL/支 |
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PSNAb-0004-EGFP |
PS-HPV(18)-VLP-L1&L2-EGFP |
EGFP |
500μL/支 |
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PSNAb-0004-mCherry |
PS-HPV(18)-VLP-L1&L2-mCherry |
mCherry |
500μL/支 |
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PSNAb-0004-Luciferase&EGFP |
PS-HPV(18)-VLP-L1&L2-Luciferase&EGFP |
Luciferase&EGFP |
500μL/支 |
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HPV(31) |
PSNAb-0005-Luc |
PS-HPV(31)-VLP-L1&L2-Luciferase |
Luciferase |
500μL/支 |
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PSNAb-0005-EGFP |
PS-HPV(31)-VLP-L1&L2-EGFP |
EGFP |
500μL/支 |
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PSNAb-0005-mCherry |
PS-HPV(31)-VLP-L1&L2-mCherry |
mCherry |
500μL/支 |
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PSNAb-0005-Luciferase&EGFP |
PS-HPV(31)-VLP-L1&L2-Luciferase&EGFP |
Luciferase&EGFP |
500μL/支 |
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HPV(33) |
PSNAb-0006-Luc |
PS-HPV(33)-VLP-L1&L2-Luciferase |
Luciferase |
500μL/支 |
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PSNAb-0006-EGFP |
PS-HPV(33)-VLP-L1&L2-EGFP |
EGFP |
500μL/支 |
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PSNAb-0006-mCherry |
PS-HPV(33)-VLP-L1&L2-mCherry |
mCherry |
500μL/支 |
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PSNAb-0006-Luciferase&EGFP |
PS-HPV(33)-VLP-L1&L2-Luciferase&EGFP |
Luciferase&EGFP |
500μL/支 |
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HPV(45) |
PSNAb-0007-Luc |
PS-HPV(45)-VLP-L1&L2-Luciferase |
Luciferase |
500μL/支 |
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PSNAb-0007-EGFP |
PS-HPV(45)-VLP-L1&L2-EGFP |
EGFP |
500μL/支 |
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PSNAb-0007-mCherry |
PS-HPV(45)-VLP-L1&L2-mCherry |
mCherry |
500μL/支 |
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PSNAb-0007-Luciferase&EGFP |
PS-HPV(45)-VLP-L1&L2-Luciferase&EGFP |
Luciferase&EGFP |
500μL/支 |
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HPV(52) |
PSNAb-0008-Luc |
PS-HPV(52)-VLP-L1&L2-Luciferase |
Luciferase |
500μL/支 |
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PSNAb-0008-EGFP |
PS-HPV(52)-VLP-L1&L2-EGFP |
EGFP |
500μL/支 |
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PSNAb-0008-mCherry |
PS-HPV(52)-VLP-L1&L2-mCherry |
mCherry |
500μL/支 |
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PSNAb-0008-Luciferase&EGFP |
PS-HPV(52)-VLP-L1&L2-Luciferase&EGFP |
Luciferase&EGFP |
500μL/支 |
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HPV(58) |
PSNAb-0009-Luc |
PS-HPV(58)-VLP-L1&L2-Luciferase |
Luciferase |
500μL/支 |
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PSNAb-0009-EGFP |
PS-HPV(58)-VLP-L1&L2-EGFP |
EGFP |
500μL/支 |
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PSNAb-0009-mCherry |
PS-HPV(58)-VLP-L1&L2-mCherry |
mCherry |
500μL/支 |
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PSNAb-0009-Luciferase&EGFP |
PS-HPV(58)-VLP-L1&L2-Luciferase&EGFP |
Luciferase&EGFP |
500μL/支 |
★ 另外我们可提供原始株、Omicron株等SARS-COV-2假病毒载体(Pseudovirus VSV/LV-S)现货。
★ 可定制不同病毒株和报告系统,与真病毒结果相关性高(>90%)。
地址:中国武汉东湖高新区光谷七路128号 市场:17720522078 人事行政:027-62439686 邮箱:marketing@genevoyager.com
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本公司所有产品仅供实验科研使用,不用于人体疾病治疗及临床诊断。