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中和抗体类

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中和抗体是由B淋巴细胞分泌的可溶性蛋白,能够特异性识别病原体(如病毒、细菌)表面抗原,通过阻断其与宿主细胞受体的结合,阻止病原体入侵和复制,是评估疫苗效果和免疫应答的核心指标。常用的中和抗体检测方法大致可归为三种:真病毒中和实验、Elisa中和实验、假病毒中和实验(Pseudovirion-BasedNeutralizationAssay ,PBNA)。


真病毒中和实验:直接使用活病毒,完全模拟自然感染过程来检测中和抗体阻断病毒入侵宿主细胞的能力,但由于真病毒具有传染性和致病性,对实验室等级要求高(高致病性病毒需在BSL-3实验室操作)。


Elisa中和实验:具有无需细胞培养,检测速度快,安全性高等特点,但可能漏检非结合型中和抗体,灵敏度不足,导致容易出现假阳性或假阴性的错误结果。


PBNA:假病毒无自主复制能力,生物安全性较高,可在BSL-2实验室操作;可实现高通量与自动化——基于荧光素酶(Luc)或绿色荧光蛋白(GFP等)报告基因,支持96/384孔板检测,结果通过化学发光仪或Celigo自动读取;但与真病毒相比仍然具有一定的差异性。


指标

真病毒中和实验

Elisa中和实验

假病毒中和实验

生物安全要求

BSL-3(高危病毒)

BSL-1

BSL-2

检测周期

5-7天

1-2小时

1-2天

通量

功能性评估

完整感染周期

仅抗原结合

仅入侵阶段

灵敏度

高(金标准)

中低

高(接近真病毒)


鉴于世界卫生组织(WHO)疫苗生产和控制指南的建议,使用PBNA来评估针对人类乳头瘤病毒(HPV)、狂犬病毒(RV)、肠道病毒71型(EV71)、人类免疫缺陷病毒(HIV)、中东呼吸综合征(MERS-CoV)、埃博拉病毒(EBOV)、等疫苗的有效性。

劲帆医药中和抗体假病毒

假病毒(Pseudoviruses)是一种具有单轮感染能力的重组病毒颗粒,对于无包膜病毒通常利用其自身结构蛋白制备假病毒;对于包膜病毒,一般常用水疱口炎病毒(VSV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)等包装体系制备假病毒。


劲帆医药根据《基于假病毒的中和抗体检测法指导原则》对中和抗体类假病毒进行制备及分析方法开发,并建立了完整的制备与检测体系,可承接假病毒中和抗体检测服务,助力疫苗及流行病学研究。


以慢病毒为例的假病毒的生产及中和抗体检测示意图(图片来源:Fantoni,Tobia et al, Journal of visualized experiments.,2023)

产品优势

01

真实性好:采用模拟外膜/壳结构假病毒,更真实反映临床样本中的病毒侵染机制。










02

安全性高:仅有单轮的感染力,无自主复制能力,具有高生物安全性,可在BSL-2实验室操作。





03

稳定性优:优化制备工艺,批次间质量高度稳定。





04

高质量假病毒制备:优质细胞株助力快速生产活性更好的假病毒产品。





05

结果直观:基于多种报告基因建立不同制备体系,结果通过化学发光仪或Celigo自动读取。




应用场景


01

疫苗效果评价:检测疫苗注射后血清中中和抗体的水平,评估疫苗的免疫效果。










02

药物筛选与评价:病毒抑制剂的筛选及药效评价。





03

机制探索:病毒感染机制研究





产品种类

服务流程

中和抗体类假病毒产品现货列表

货号

类别

产品名称

装载基因

滴度

(TCID50/mL)

规格

周期

推荐用途

PSNAb-0010

RV-水疱性口炎病毒

假病毒

PS-Rabies virus-VSV-GFP/mCherry

GFP、mCherry

1.00E+7 

100 μL/支

18-25

受体药物筛选、中和抗体活性检测及疫苗效果评价

PSNAb-0011

RV-慢病毒

假病毒

PS-Rabies virus-LV-GFP/mCherry/Luc

GFP、mCherry、Luciferase

100 μL/支

7-15

PSNAb-0012

MERS-水疱性口炎病毒

假病毒

PS-MERS-VSV-GFP/mCherry

GFP、mCherry

100 μL/支

18-25

PSNAb-0013

MERS-慢病毒

假病毒

PS-MERS-LV-GFP/mCherry/Luc

GFP、mCherry、Luciferase

100 μL/支

7-15

PSNAb-0014

Influenza-水疱性口炎病毒

假病毒

PS-Influenza-H1N1-VSV-GFP/mCherry

GFP、mCherry

100 μL/支

18-25

PSNAb-0015

PS-Influenza-H3N2-VSV-GFP/mCherry

PSNAb-0016

PS-Influenza-H5N1-VSV-GFP/mCherry

PSNAb-0017

PS-Influenza-H7N9-VSV-GFP/mCherry

PSNAb-0018

Influenza-慢病毒

假病毒

PS-Influenza-H1N1-LV-GFP/mCherry/Luc

GFP、mCherry、Luciferase

100 μL/支

7-15

PSNAb-0019

PS-Influenza-H3N2-LV-GFP/mCherry/Luc

PSNAb-0020

PS-Influenza-H5N1-LV-GFP/mCherry/Luc

PSNAb-0021

PS-Influenza-H7N9-LV-GFP/mCherry/Luc

PSNAb-0022

EBOV-水疱性口炎病毒

假病毒

PS-EBOV-VSV-GFP/mCherry

GFP、mCherry

100 μL/支

18-25

PSNAb-0023

EBOV-慢病毒

假病毒

PS-EBOV-LV-GFP/mCherry/Luc

GFP、mCherry、Luciferase

100 μL/支

7-15


* 我们还可提供原始株、Omicron株等SARS-CoV-2假病毒载体(Pseudovirus VSV/LV-S)现货;可定制不同病毒株和报告系统,与真病毒结果相关性高(>90%);可根据客户要求定制其他规格。

用于检测的AAV产品

携带报告基因的AAV病毒:Luciferase/EGFP/mCherry;AAV空壳病毒

AAV1

AAV1/2

AAV2

AAV2-7m8

AAV oligo001

AAV5

AAV6

AAV6m

AAV6.2

AAV7

AAV8

AAV9

rAAV2-retro

AAV-PHP.eB

AAV-B10

AAV-PHP.S

AAV-PAN

AAV-DJ

AAV-ShH10

AAV-ShH10(Y445F)

AAV-Rh10

AAV-Anc80L65

AAV-BR1

AAV-BI30

AAV-SCH9

AAV MaCPNS1

AAV MaCPNS2

mac

AAV DSS

......

我司可提供用于中和抗体和总抗体检测的AAV产品,更多其他血清型病毒生产请咨询


应用案例

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